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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見問(wèn)題和解決方法

更新時(shí)間:2020-08-18   點(diǎn)擊次數(shù):1675次
   elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
  接下來(lái)小編為您一起了解下ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中常見原因如下:
  a)可能原因:加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;
  解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密。
  重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與在次接近;
  重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
  b)可能原因:加樣過(guò)快,孔間發(fā)生污染;
  解決方法:重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過(guò)快。
  c)可能原因:加錯(cuò)樣本;
  解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯(cuò)樣本。
  d)可能原因:加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);
  解決方法:加樣槍頭不要貼壁。
  e)可能原因:不同批號(hào)試劑盒中組分混用;
  解決方法:不同批號(hào)試劑盒中組分不可混用。
  f)可能原因:溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;
  解決方法:檢查時(shí)間是否一致。
  g)可能原因:孔內(nèi)污染雜物;
  解決方法:離心樣品,排除雜物。
  h)可能原因:試劑/樣品沒(méi)有混勻;
  解決方法:充分混勻樣品和試劑。
  i)可能原因:血清標(biāo)本未*凝固即加入,反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血細(xì)胞,易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)等。
  解決方法:待血清標(biāo)本*凝固后做試驗(yàn)。
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